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    你知道移液槍怎樣才能延年益壽?!

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-11-24
    核心提示:移液槍是實(shí)驗(yàn)操作上不可缺少的工具,對(duì)于頂尖高手而言,重要的就是實(shí)驗(yàn)的誤差最小,重復(fù)再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用。移
    移液槍是實(shí)驗(yàn)操作上不可缺少的工具,對(duì)于頂尖高手而言,重要的就是實(shí)驗(yàn)的誤差最小,重復(fù)再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用。

    移液槍的分類和工作原理

    氣體活塞式移液槍

    工作原理:通過彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng),推動(dòng)活塞,排除部分空氣,利用大氣壓吸入液體,再由活塞推動(dòng)空氣排除液體。

    塞式移液槍

    工作原理:通過分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運(yùn)動(dòng)移取和打出液體,活塞和液體直接接觸,沒有空氣柱,適用于密度、黏度與水不同的液體,如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。

    移液槍使用訣竅

    氣體活塞式移液槍

    1影響移液槍精度因素


    (1)溫度:室溫低時(shí),手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時(shí)往往發(fā)生誤差。

    (2)氣密性:吸頭和槍體的結(jié)合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長(zhǎng)期磨損,造成誤差。

    (3)吸速:容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會(huì)污染槍頭。

    (4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時(shí),蒸汽進(jìn)入槍頭,內(nèi)壓增高,結(jié)果在壓出液體時(shí),壓力變大,而產(chǎn)生誤差。解決辦法:反復(fù)抽吸4-5次就可改善。


    2具體使用方法

    更換tip法:最精確。

    (1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。

    (2)插上tip:無菌操作時(shí),要注意動(dòng)作迅速正確,不能用手碰tip,動(dòng)作的力度要保持一致,禁止廢動(dòng)作。普通操作時(shí),可用拇指食指上緊,但手不能碰tip尖端處。

    (3)指壓到第一段,tip尖端接觸試劑。白色tip進(jìn)到液面1 mm一下,黃色吸頭 2-3 mm,藍(lán)色吸頭2-4 mm,避免液壓的影響造成的誤差。

    (4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進(jìn)入槍頭。

    (5)移出吸頭后,先在容器內(nèi)壁輕輕靠住,使吸頭外壁液體流下。

    (6)將吸頭貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁,輕輕按到第一段,壓出液體。

    (7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動(dòng),保留尖端少量液體,移出目標(biāo)容器,手指卸掉吸頭,注意不要使試劑濺出。

    一只吸頭分注法:不適用于揮發(fā)性,有毒性試劑。

    (1)同上述A-D,移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。

    (2)同上述C,緩慢吸出液體。

    (3)在目標(biāo)容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。

    (4)緩慢返回第一段,可重復(fù)上述操作。達(dá)到目標(biāo)容器原有液體不污染吸頭的目的。

    轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時(shí)的方法:

    (1)同上述A-D,移出液面后,在容器內(nèi)壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色吸頭進(jìn)到液面1 mm以下,這最重要。

    (2)tip尖端浸入目標(biāo)容器的液面下,緩慢壓到第一段。

    (3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復(fù)4-5次,,洗凈吸頭內(nèi)壁液體。

    (4)將吸頭尖端移出液面,在內(nèi)壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。

    移液槍使用注意事項(xiàng),要注意以下幾點(diǎn):

    1. 正確選擇移液槍與吸頭組合量程

    空氣柱的體積越小,誤差越低。

    2. 吸頭的浸沒深度

    吸頭盡量浸沒得淺一些,防止液體殘留在吸頭表面,但是同時(shí)要浸沒得足夠深防止吸取空氣。

    3. 垂直吸取液體

    移液時(shí)角度不同,液體壓力也會(huì)改變。

    4. 預(yù)潤(rùn)濕

    通過預(yù)潤(rùn)濕,使得空氣柱充滿飽和的液體分子,至少預(yù)潤(rùn)濕3次,使得空氣柱里的液體分子達(dá)到飽和。

    5. 正確的放液操作

    放液時(shí),吸頭尖靠在容器內(nèi)壁,完全打出,排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。

    6. 緩慢、勻速的吸放液體,保證結(jié)果的精確性。

    移液六部曲

    1. 裝吸頭

    移液器套柄用力下壓,需要時(shí)小幅度旋轉(zhuǎn)即可。

    錯(cuò)誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會(huì)帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。

    2. 量程設(shè)定

    操作之前請(qǐng)先選擇正確的移液器,移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作,但在10%量程處操作對(duì)于移液技巧要求高,故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。

    量程調(diào)節(jié):當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí),朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時(shí),直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。

    3. 潤(rùn)洗

    用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次,潤(rùn)洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。

    注意:高溫或者低溫液體請(qǐng)不要潤(rùn)洗!

    4. 吸頭浸入角度

    吸液時(shí)盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過20°。

    5. 吸頭浸入深度:0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul:6-10mm。

    6. 吸頭浸入時(shí)間

    吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對(duì)于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。

    7. 吸液速度

    勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會(huì)造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部,污染活塞等部件。

    8. 排液及吹液

    先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。

    排液四種方式:沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。

    9. 手溫

    移液器不宜長(zhǎng)時(shí)間握在手里,不用時(shí)最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。

    移液槍的維護(hù)保養(yǎng)



    密封性檢查



    1.儀器測(cè)漏

    2.簡(jiǎn)單目測(cè)法

    1)200uL及以下的移液器,吸液后將吸頭浸入液面1-2mm,靜待20秒,觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。

    2)1000uL以上的移液器,吸液后將吸頭移出液面,朝下垂直靜置15-20秒,觀察是否有液體下滴。





    移液器的清洗方式



    外部清潔:

    日常清潔劑(專業(yè)清洗劑,肥皂液,洗潔精等)擦洗,然后用純水淋洗,晾干即可 。



    內(nèi)部清潔:

    1)下半部分拆卸下來。

    2)塑料部件(套柄等)采用與外部清潔一致的方式即可。

    3)活塞清潔可用純水(或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈),晾干, 然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。

    注:移液器主體密封部分,大多是免維護(hù)的,不能輕易拆卸。




    移液器的故障分析解決


    問題

    可能原因

    解決方法

    吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確

    吸頭松脫或吸頭不匹配

    插緊吸頭;更換匹配的吸頭

    移取粘稠、易揮發(fā)性或與水密度有明顯差異的液體

    預(yù)潤(rùn)濕吸頭數(shù)次

    移液過快

    緩慢移動(dòng)控制按鈕,慢吸慢放

    吸頭離開液面過快

    在液面下停留3秒鐘,再緩慢移出吸頭

    活塞被污染或損壞

    清潔或更換活塞

    移液槍吸嘴損壞

    更換移液槍下半部分零件或通道

    控制按鈕移動(dòng)困難,發(fā)澀。

    活塞被污染

    密封圈污染

    移液槍堵塞

    清潔移液槍下半部分

    更換過濾芯

    安裝吸頭時(shí)吸嘴無彈性伸縮

    鎖定環(huán)取消了彈簧加載

    取下鎖定環(huán)


    文章(文字)來源:網(wǎng)絡(luò)
    編輯:songjiajie2010

     
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