檢測點
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檢驗項目 |
技 術(shù) 要 求 |
檢驗方法 |
采樣方法 |
檢測頻率 |
判定
方案 |
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工器具、
案板等接觸面
(生產(chǎn)現(xiàn)場) |
菌落
總數(shù) |
≤5000個/25cm2 (生)
≤2500個/25cm2(熟) |
梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告 |
用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面,取25cm2的面積,在其內(nèi)涂抹10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢 |
1次/周/車間 |
一項不合格判為不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》執(zhí)行 |
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大腸
菌群 |
≤30MPN/25cm2(生)
陰性(熟) |
試管法:梯度稀釋,三個稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管,36±1℃,48h后記錄產(chǎn)氣管數(shù),然后復(fù)發(fā)酵,記錄產(chǎn)氣管數(shù),查MPN表報告 |
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員工手
(生產(chǎn)現(xiàn)場) |
菌落
總數(shù) |
≤5000個/手(生)
≤2500個/手(熟) |
梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告 |
被檢人五指并攏,用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面,從指尖到指端來回涂擦10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢 |
1次/周/車間 |
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大腸
菌群 |
≤90MPN/手(生)
陰性(熟) |
試管法:梯度稀釋,三個稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管,36±1℃,48h后記錄產(chǎn)氣管數(shù),然后復(fù)發(fā)酵,記錄產(chǎn)氣管數(shù),查MPN表報告 |
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空
氣 |
車間 |
菌落
總數(shù) |
≤30個/皿 |
平板暴露法:車間在30m2以上者,于東、西、南、北(距墻1m處)、中五點;小于30m2者,于一條對角線里、中、外三點,高度均在1.5m處采樣,打開平皿蓋,使平板在空氣中暴露30 min |
取樣后的瓊脂培養(yǎng)基于37℃溫箱培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果,求出5個或3個采樣點的平均菌數(shù) |
2次/月/車間 |
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更衣室 |
菌落
總數(shù) |
≤40個/皿 |
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生產(chǎn)用水 |
菌落
總數(shù) |
≤100CFU/ml |
梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告 |
對待取樣的水龍頭進(jìn)行消毒,并打開水龍頭數(shù)分鐘,用經(jīng)過滅菌的玻璃采樣瓶去水樣0.5L后及時送檢,采樣后按照每125ml水樣加入0.1mg硫代硫酸鈉除去殘留余氯。 |
1次/月,全年檢測完所有水龍頭 |
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大腸菌群 |
不得檢出 |
多管發(fā)酵法: 1、乳糖發(fā)酵試驗:接種5份10 mL水樣雙料培養(yǎng)基,每份接種10ml水樣,將接種管置36℃ 士l℃ 培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)24h士2h,如所有乳糖蛋白膝培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)酸,則可報告為總大腸菌群陰性,如有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者,則按下列步驟進(jìn)行。 2、分離培養(yǎng):將產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,于36℃ 土1℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h—24h,觀察菌落形態(tài),挑取符合下列特征的菌落作革蘭氏染色、鏡檢和證實試驗。 3、證實試驗:經(jīng)上述染色鏡檢為革蘭氏陰性無芽抱桿菌,同時接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,置36℃ 士1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h士2h,有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者,即證實有總大腸菌群存在。 4、結(jié)果報告:查MPN ( most Probable number,最可能數(shù))檢索表,報告每l00ml水樣中的總大腸菌群最可能數(shù)(MPN)值。稀釋樣品查表后所得結(jié)果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時,可報告總大腸菌群未檢出 |