在各種微生物檢驗(yàn)中,我們會(huì)看到標(biāo)準(zhǔn)中會(huì)涉及CFU/g或CFU/mL這些單位。什么是CFU?CFU代表了什么?我們先從CFU的基本定義開始。
CFU:Colony-Forming Units(菌落形成單位)指單位體積中的細(xì)菌、霉菌、酵母等微生物的群落總數(shù)。
在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí),由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的集落,稱為菌落形成單位,以其表達(dá)活菌的數(shù)量。
我們都非常清楚了解,微生物無處不在,但由于其個(gè)體極其微小,往往無法通過肉眼看到,必須借助高倍顯微鏡甚至染色后才能清楚觀察到。而菌落形成單位(CFU)則是通過分散、稀釋,最終由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的肉眼可見的菌落數(shù)來反推樣品中活菌數(shù)量的一種方式。
這種方式得出的數(shù)據(jù),并不是直接反映樣品中的微生物數(shù)量,而是一種認(rèn)可的估算,所以要求操作者平板涂布或者接種之前把微生物活細(xì)胞分散均勻。但一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細(xì)胞分散均勻。另外,考慮到各類樣品的微生物含量不一,為使CFU區(qū)間按照國(guó)標(biāo)計(jì)算方法有效落在30-300之間,必須要保證合理的稀釋倍數(shù),過多或者過少都不合適。
2.CFU是一種估算方法
菌落形成單位的計(jì)量方式與一般的計(jì)數(shù)方式不同,一般直接在顯微鏡下計(jì)算菌體數(shù)量會(huì)將活與死的菌體全部算入,但是CFU只計(jì)算活的菌體數(shù)量,也就是說能夠在平板上生長(zhǎng)出來的活的微生物才會(huì)形成CFU。理論上,分散均勻的情況下,一個(gè)活細(xì)胞形成1CFU。在實(shí)際操作中為了更好分散,很經(jīng)常用到渦旋振蕩器進(jìn)行混勻,但容易出現(xiàn)死菌。
同時(shí),微生物最終能在平板培養(yǎng)基上形成菌落還與培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)溫度及時(shí)間、接種方式、潛在微生物類型均有關(guān)系。所以,您會(huì)發(fā)現(xiàn),高溫高濕天氣時(shí),烘焙食品中更容易出現(xiàn)各類霉菌、細(xì)菌污染的質(zhì)量問題。
最后,來說說CFU的現(xiàn)實(shí)意義。舉例來說,若定量菌種的菌種數(shù)量標(biāo)示的是“CFU”,代表是用培養(yǎng)基法來計(jì)數(shù)的。若定量菌種是用流式細(xì)胞儀等其他方式計(jì)數(shù),標(biāo)示“個(gè)”更為合理。
通過以上說明,相信大家對(duì)CFU和微生物繁殖應(yīng)該都有了一定的理解。