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索氏抽提法
巴布科克法和蓋勃氏法
(一) 原 理
用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì), 將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白, 脂肪球膜被破壞, 脂肪游離出來, 再利用加熱離心, 使脂肪完全迅速分離, 直接讀取脂肪層可知被測(cè)乳的含脂率。
(二) 適用范圍與特點(diǎn)
這兩種方法都是測(cè)定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法, 適用于鮮乳及乳制品脂肪的測(cè)定。但不適合測(cè)定含巧克力、糖的食品, 因?yàn)榱蛩峥墒骨煽肆吞前l(fā)生炭化，結(jié)果誤差較大。 改良巴布科克氏法可用于測(cè)定風(fēng)味提取液中芳香油的含量 (AOAC 法 932.11) 及海產(chǎn)品中脂肪 (AOAC 法 964.12) 的含量。
巴布科克氏法和蓋勃氏法的原理相似，蓋勃氏法較巴布科克法簡(jiǎn)單快速，多用一種試劑異戊醇。使用異戊醇是為了防止糖炭化。該法在歐洲比在美國(guó)使用更為廣泛。
(三) 測(cè)定方法
l.巴布科克法
(1) 精確吸取 17.6 mL 牛乳于巴布科克氏乳脂瓶中。
(2) 加入硫酸 (相對(duì)密度 1.816 ±0.003, 20℃) 17.5mL, 硫酸沿瓶頸壁慢慢倒入, 將瓶頸回旋, 充分混合至無(wú)凝塊并呈均勻的棕色。
(3) 將乳脂瓶離心 5min (約 1000r / min), 脂肪分離升至瓶頸基部。
(4) 加入熱水使脂肪上浮到瓶頸基部, 離心 2min。
(5) 再加入熱水使脂肪上浮到 2 或3刻度處，離心 1min。
(6) 置 55～60℃水浴 5min 后, 立即讀取脂肪層最高與最低點(diǎn)所占的格數(shù), 即為樣品含脂肪的百分率。
2.蓋勃氏法
(1) 將 l0 mL 硫酸倒入蓋勃氏乳脂瓶中。
(2) 精確吸取 11 mL 牛乳于蓋勃氏乳脂瓶中。
(2) 加入 l mL 異戊醇 (相對(duì)密度 0.811± 0.002, 20℃,沸程 128～132℃)。
(4) 蓋緊塞子，振搖至呈均勻棕色液體, 靜置數(shù)分鐘。
(5) 置于 65～70℃水浴中 5min。
(6) 取出擦干, 調(diào)節(jié)脂肪柱在刻度內(nèi), 放入離心機(jī)(800~1000r / min)中離心 5min。
(7) 將乳脂瓶置 65~70℃水浴, 5min 后取出, 立即讀數(shù), 即為脂肪的含量。
(四) 說明與討論
1. 硫酸的濃度要嚴(yán)格遵守規(guī)定的要求, 如過濃會(huì)使乳炭化成黑色溶液而影響讀數(shù); 過稀則不能使酪蛋白完全溶解, 會(huì)使測(cè)定值偏低或使脂肪層渾濁。
2. 硫酸除可破壞脂肪球膜, 使脂肪游離出來外, 還可增加液體相對(duì)密度, 使脂肪容易浮出。
3. 蓋勃氏法中所用異戊醇的作用是促使脂肪析出, 并能降低脂肪球的表面張力, 以利于形成連續(xù)的脂肪層。
4. l mL 異戊醇應(yīng)能完全溶于酸中, 但由于質(zhì)量不純, 可能有部分析出摻入到油層, 而使結(jié)果偏高。
5. 加熱 (65~70℃水浴中) 和離心的目的是促使脂肪離析。
6. 羅紫一哥特里法、巴布科克法和蓋勃法都是測(cè)定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。根據(jù)對(duì)比研究表明, 前者的準(zhǔn)確度較后兩者高, 后兩者中巴布科克法的準(zhǔn)確度比蓋勃法的稍高些, 兩者差異顯著。
酸水解法原理：樣品經(jīng)酸水解后用乙醚提取，除去溶劑即得游離及結(jié)合脂肪總量。
酸水解法試劑：鹽酸、95％乙醇、乙醚、石油醚、100毫升具塞刻度量筒
酸水解法實(shí)驗(yàn)過程：1、樣品處理： (1)固體樣品：精密稱取約2克水，混勻后再加重。毫升鹽酸。置于50毫升大試管內(nèi)，加8毫升；(2)液體樣品：稱取10.0克，置于50毫升大試管內(nèi)，加10毫升鹽酸。
2、將試管放70-80℃水浴中，每隔5-10分鐘以玻璃棒攪拌一次，至樣品消化完全為止，約40-50分鐘。
3、取出試管，加人10毫升乙醇，混合。冷卻后將混合物移于100毫升具塞量筒中，以25毫升乙醚分次洗試管，一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振搖1分鐘，小心開塞，放出氣體，再塞好。靜置12分鐘，小心開塞，并用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10-20分鐘，待上部液體清晰，吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi)，再加5毫升乙醚于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶?jī)?nèi)。將錐形瓶置水浴上蒸干，置95-105℃烘箱中干燥2小時(shí)，取出放入干燥器內(nèi)冷卻0.5小時(shí)后稱重。
酸水解法 計(jì)算：
X=(m1-m0)/m2
X：樣品中脂肪的含量％；
m1：接受瓶與脂肪的質(zhì)量，g；
m2：接受瓶的質(zhì)量，g。
MM_FS_CNG_0390
植物油脂檢驗(yàn)雜質(zhì)測(cè)定法
適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于商品植物油脂中雜質(zhì)含量的測(cè)定。
說明
植物油脂中的雜質(zhì)為不溶于石油醚等有機(jī)溶劑的殘留物。
3.主要試劑和儀器
3.1.主要試劑
抽氣泵；
抽氣瓶；
安全瓶；
2號(hào)玻璃砂芯漏斗；
膠管；
稱量皿；
鑷子、量筒、玻棒；
天平：感量0.0001g。
3.2.試劑
石油醚（沸程60～90℃）；
95％乙醇；
酸洗石棉；
脫脂棉；
定量濾紙（代替石棉用）等。
4.過程簡(jiǎn)述
準(zhǔn)備抽氣裝置：用膠管連接抽氣泵、安全瓶和抽氣瓶。用水將石棉分成粗、細(xì)兩部分，先用粗的，后用細(xì)的石棉鋪墊玻璃砂芯漏斗（約3mm厚），先用水沿玻棒傾入漏斗中抽洗，后用少量乙醇和石油醚先后抽洗，待石油醚揮凈后，將漏斗送入105℃電烘箱中，烘至前后兩次重量差不超過0.001g為止。
抽濾雜質(zhì)：稱取混勻試樣15～20g（W）于燒杯中，加入20～25ml石油醚（蓖麻油用95％乙醇），用玻棒攪拌使試樣溶解，傾入漏斗中，用石油醚將燒杯中的雜質(zhì)干凈地洗入漏斗內(nèi)，再用石油醚分?jǐn)?shù)次抽洗雜質(zhì)，洗至無(wú)油跡為止。
烘干雜質(zhì)：用脫脂棉揩凈漏斗外部，在105℃溫度下烘至恒重（W1）。
5.結(jié)果計(jì)算
雜質(zhì)含量按下列公式計(jì)算：
雜質(zhì)（％）＝
W1
×100
W
式中：W1——雜質(zhì)重量，g；
W——試樣重量，g。
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
6.來源：
GB 5529—85
植物油脂檢驗(yàn)雜質(zhì)測(cè)定法
適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于商品植物油脂中雜質(zhì)含量的測(cè)定。
說明
植物油脂中的雜質(zhì)為不溶于石油醚等有機(jī)溶劑的殘留物。
3.主要試劑和儀器
3.1.主要試劑
抽氣泵；
抽氣瓶；
安全瓶；
2號(hào)玻璃砂芯漏斗；
膠管；
稱量皿；
鑷子、量筒、玻棒；
天平：感量0.0001g。
3.2.試劑
石油醚（沸程60～90℃）；
95％乙醇；
酸洗石棉；
脫脂棉；
定量濾紙（代替石棉用）等。
4.過程簡(jiǎn)述
準(zhǔn)備抽氣裝置：用膠管連接抽氣泵、安全瓶和抽氣瓶。用水將石棉分成粗、細(xì)兩部分，先用粗的，后用細(xì)的石棉鋪墊玻璃砂芯漏斗（約3mm厚），先用水沿玻棒傾入漏斗中抽洗，后用少量乙醇和石油醚先后抽洗，待石油醚揮凈后，將漏斗送入105℃電烘箱中，烘至前后兩次重量差不超過0.001g為止。
抽濾雜質(zhì)：稱取混勻試樣15～20g（W）于燒杯中，加入20～25ml石油醚（蓖麻油用95％乙醇），用玻棒攪拌使試樣溶解，傾入漏斗中，用石油醚將燒杯中的雜質(zhì)干凈地洗入漏斗內(nèi)，再用石油醚分?jǐn)?shù)次抽洗雜質(zhì)，洗至無(wú)油跡為止。
烘干雜質(zhì)：用脫脂棉揩凈漏斗外部，在105℃溫度下烘至恒重（W1）。
5.結(jié)果計(jì)算
雜質(zhì)含量按下列公式計(jì)算：
雜質(zhì)（％）＝
W1
×100
W
式中：W1——雜質(zhì)重量，g；
W——試樣重量，g。
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
6.來源：
GB 5529—85
MM_FS_CNG_0386
植物油脂檢驗(yàn)磷脂測(cè)定法
1.適用范圍
本方法適用于商品植物油脂中磷脂的測(cè)定。
2.原理概要
油脂中磷脂即由甘油、脂肪酸、磷酸和氨基醇等所組成的復(fù)雜的化合物。
3.鉬藍(lán)比色法
3.1.主要試劑和儀器
3.1.1.主要試劑
50％氫氧化鉀溶液；
鹽酸、硫酸、氧化鋅、濾紙；
0.015％硫酸聯(lián)氨溶液；
2.5％鉬酸鈉稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中，搖勻，冷卻至室溫，加入12.5g鉬酸鈉，溶解后加水至500ml，搖勻，靜置24h備用；
磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取無(wú)水的磷酸二氫鉀0.4391g溶于1000ml水中，作為1號(hào)液，含磷0.1mg／ml，吸取1號(hào)液10ml，加水稀釋至100ml，含磷0.01mg／ml，作為2號(hào)液，比色用。
3.1.2.儀器
瓷坩堝或石英坩堝；
分光光度計(jì)或帶塞的50ml比色管；
移液管：5、10ml；
電爐、高溫爐；
容量瓶：100、500、1000ml；
表面皿、燒杯、量筒；
恒溫水浴鍋；
漏斗、坩堝鉗、試劑瓶等。
3.2.樣品制備
用坩堝稱取試樣約10g（準(zhǔn)確至0.001g），加氧化鋅0.5g，先在電爐上加熱炭化，然后送入550～600℃的高溫爐中灼燒至灰化（白色），灼燒時(shí)間約2h，取出坩堝冷卻至室溫，用熱鹽酸（1∶1）10ml溶解灰分，并加熱微沸5min，將溶解液過濾注入100ml容量瓶中，用熱水沖洗坩堝和濾紙，待濾液冷卻至室溫后，用50％氫氧化鉀溶液中和至出現(xiàn)混濁，緩慢滴加鹽酸使氧化鋅沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀釋至刻度，搖勻。
3.3.過程簡(jiǎn)述
3.3.1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：取5只50ml比色管，編成1，2，4，6，8五個(gè)號(hào)碼，按號(hào)碼順序分別注入磷標(biāo)準(zhǔn)2號(hào)液1，2，4，6，8ml，再按順序分別加水9，8，6，4，2ml。接著向5只管內(nèi)各加0.015％硫酸聯(lián)氨溶液8.0ml；各加鉬酸鈉稀硫酸溶液2.0ml，加塞、搖勻。去塞，將5只管置于正在沸騰的水浴中加熱10min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50ml，充分搖勻，經(jīng)10min后，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)650nm下，用3cm液槽，用水調(diào)整零點(diǎn)，分別測(cè)定消化值。以消化值為縱坐標(biāo)，以磷量（0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.3.2.比色：用移液管吸取被測(cè)液10ml注入50ml比色管中，加入0.015％硫酸聯(lián)氨8.0ml，加2.0ml鉬酸鈉稀硫酸溶液，加塞，搖勻。去塞，將比色管置于正在沸騰的水浴中加熱10min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50ml，充分搖勻，經(jīng)10min后，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)650nm下，用3cm液槽，用水調(diào)整零點(diǎn)，測(cè)定消光值。
3.4.結(jié)果計(jì)算
根據(jù)被測(cè)液的消光值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得磷量（P），按公式（1）計(jì)算磷脂含量：
磷脂（％）＝P×
V2
×26.31×
100
……………………（1）
V1
W×1000
式中：P——標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的磷量，mg；
V2——樣品灰化后稀釋的體積，ml；
V1——比色時(shí)所取的被測(cè)液體積，ml；
26.31——每毫克磷相當(dāng)于磷脂的毫克數(shù)；
W——試樣重量，g。
3.5.允許差
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
4.重量法
4.1.主要試劑和儀器
4.1.1.主要試劑
丙酮。
4.1.2.儀器
玻璃漏斗、漏斗架；
燒杯：100ml；
錐形瓶、濾紙等。
4.2.過程簡(jiǎn)述
取混勻的樣品約100ml，加熱約90℃時(shí)進(jìn)行過濾。用燒杯稱取試樣25g，加熱至80℃，加水2～2.5ml，充分?jǐn)嚢枋怪�，在室溫下靜置過夜，或進(jìn)行離心沉淀，傾出上層清液，用已知恒重的濾紙（或用抽氣裝置抽濾）進(jìn)行過濾，待濾液全部濾出后，用冷的丙酮把杯內(nèi)殘留的沉淀沖洗入濾紙中，繼續(xù)用丙酮洗滌濾紙和沉淀，洗至無(wú)油跡為止。待濾紙和沉淀上的丙酮揮盡后，送入105℃烘箱中烘至恒重。
4.3.結(jié)果計(jì)算
重量法測(cè)定磷脂含量按公式（2）計(jì)算：
磷脂（％）＝
W1
×100………………………………………（2）
W
式中：W1——沉淀物重量，g；
W——試樣重量，g。
4.4.允許差
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
5.來源：
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB5537—85
植物油脂檢驗(yàn)磷脂測(cè)定法
1.適用范圍
本方法適用于商品植物油脂中磷脂的測(cè)定。
2.原理概要
油脂中磷脂即由甘油、脂肪酸、磷酸和氨基醇等所組成的復(fù)雜的化合物。
3.鉬藍(lán)比色法
3.1.主要試劑和儀器
3.1.1.主要試劑
50％氫氧化鉀溶液；
鹽酸、硫酸、氧化鋅、濾紙；
0.015％硫酸聯(lián)氨溶液；
2.5％鉬酸鈉稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中，搖勻，冷卻至室溫，加入12.5g鉬酸鈉，溶解后加水至500ml，搖勻，靜置24h備用；
磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取無(wú)水的磷酸二氫鉀0.4391g溶于1000ml水中，作為1號(hào)液，含磷0.1mg／ml，吸取1號(hào)液10ml，加水稀釋至100ml，含磷0.01mg／ml，作為2號(hào)液，比色用。
3.1.2.儀器
瓷坩堝或石英坩堝；
分光光度計(jì)或帶塞的50ml比色管；
移液管：5、10ml；
電爐、高溫爐；
容量瓶：100、500、1000ml；
表面皿、燒杯、量筒；
恒溫水浴鍋；
漏斗、坩堝鉗、試劑瓶等。
3.2.樣品制備
用坩堝稱取試樣約10g（準(zhǔn)確至0.001g），加氧化鋅0.5g，先在電爐上加熱炭化，然后送入550～600℃的高溫爐中灼燒至灰化（白色），灼燒時(shí)間約2h，取出坩堝冷卻至室溫，用熱鹽酸（1∶1）10ml溶解灰分，并加熱微沸5min，將溶解液過濾注入100ml容量瓶中，用熱水沖洗坩堝和濾紙，待濾液冷卻至室溫后，用50％氫氧化鉀溶液中和至出現(xiàn)混濁，緩慢滴加鹽酸使氧化鋅沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀釋至刻度，搖勻。
3.3.過程簡(jiǎn)述
3.3.1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：取5只50ml比色管，編成1，2，4，6，8五個(gè)號(hào)碼，按號(hào)碼順序分別注入磷標(biāo)準(zhǔn)2號(hào)液1，2，4，6，8ml，再按順序分別加水9，8，6，4，2ml。接著向5只管內(nèi)各加0.015％硫酸聯(lián)氨溶液8.0ml；各加鉬酸鈉稀硫酸溶液2.0ml，加塞、搖勻。去塞，將5只管置于正在沸騰的水浴中加熱10min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50ml，充分搖勻，經(jīng)10min后，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)650nm下，用3cm液槽，用水調(diào)整零點(diǎn)，分別測(cè)定消化值。以消化值為縱坐標(biāo)，以磷量（0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.3.2.比色：用移液管吸取被測(cè)液10ml注入50ml比色管中，加入0.015％硫酸聯(lián)氨8.0ml，加2.0ml鉬酸鈉稀硫酸溶液，加塞，搖勻。去塞，將比色管置于正在沸騰的水浴中加熱10min，取出冷卻至室溫，用水稀釋至50ml，充分搖勻，經(jīng)10min后，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)650nm下，用3cm液槽，用水調(diào)整零點(diǎn)，測(cè)定消光值。
3.4.結(jié)果計(jì)算
根據(jù)被測(cè)液的消光值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得磷量（P），按公式（1）計(jì)算磷脂含量：
磷脂（％）＝P×
V2
×26.31×
100
……………………（1）
V1
W×1000
式中：P——標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的磷量，mg；
V2——樣品灰化后稀釋的體積，ml；
V1——比色時(shí)所取的被測(cè)液體積，ml；
26.31——每毫克磷相當(dāng)于磷脂的毫克數(shù)；
W——試樣重量，g。
3.5.允許差
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
4.重量法
4.1.主要試劑和儀器
4.1.1.主要試劑
丙酮。
4.1.2.儀器
玻璃漏斗、漏斗架；
燒杯：100ml；
錐形瓶、濾紙等。
4.2.過程簡(jiǎn)述
取混勻的樣品約100ml，加熱約90℃時(shí)進(jìn)行過濾。用燒杯稱取試樣25g，加熱至80℃，加水2～2.5ml，充分?jǐn)嚢枋怪�，在室溫下靜置過夜，或進(jìn)行離心沉淀，傾出上層清液，用已知恒重的濾紙（或用抽氣裝置抽濾）進(jìn)行過濾，待濾液全部濾出后，用冷的丙酮把杯內(nèi)殘留的沉淀沖洗入濾紙中，繼續(xù)用丙酮洗滌濾紙和沉淀，洗至無(wú)油跡為止。待濾紙和沉淀上的丙酮揮盡后，送入105℃烘箱中烘至恒重。
4.3.結(jié)果計(jì)算
重量法測(cè)定磷脂含量按公式（2）計(jì)算：
磷脂（％）＝
W1
×100………………………………………（2）
W
式中：W1——沉淀物重量，g；
W——試樣重量，g。
4.4.允許差
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.04％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
5.來源：
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB5537—85
MM_FS_CNG_0387
植物油脂檢驗(yàn)含皂量測(cè)定法
1．適用范圍
本方法適用于商品植物油脂含皂量的測(cè)定。
2．原理概要
油脂中的含皂量，即油脂經(jīng)過堿煉后，殘留在油脂中的皂化物數(shù)量（以油酸鈉計(jì)）。
3.主要試劑
石油醚：沸點(diǎn)60～90℃；
95％中性乙醇；
0.2％甲基紅乙醇溶液；
0.02N硫酸溶液；
無(wú)水碳酸鈉。
4.過程簡(jiǎn)述
稱取混勻試樣約10g（W），注入干燥的錐形瓶中，加入乙醇10ml和石油醚60ml，搖動(dòng)，使試樣溶解后，緩慢加入80℃的蒸餾水80ml，振搖使成乳狀，滴入3滴甲基紅指示劑，趁熱逐滴加入0.02mol/L（1/2H2SO4）硫酸溶液，每加一滴振搖一次，滴至分層下的溶液顯出微紅色為止。
5.結(jié)果計(jì)算
油脂含皂量按下列公式計(jì)算：
含皂量（％）＝
V×N×0.304
×100
W
式中：V—— 滴定用去的硫酸溶液體積，ml；
N—— 硫酸溶液的（1/2H2SO4）摩爾濃度；
W——試樣重量，g；
0.304—— 每毫克摩爾（1/2H2SO4）硫酸相當(dāng)于油酸鈉的克數(shù)。
兩次試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.02％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
6.來源：
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB5533—85
植物油脂檢驗(yàn)含皂量測(cè)定法
1．適用范圍
本方法適用于商品植物油脂含皂量的測(cè)定。
2．原理概要
油脂中的含皂量，即油脂經(jīng)過堿煉后，殘留在油脂中的皂化物數(shù)量（以油酸鈉計(jì)）。
3.主要試劑
石油醚：沸點(diǎn)60～90℃；
95％中性乙醇；
0.2％甲基紅乙醇溶液；
0.02N硫酸溶液；
無(wú)水碳酸鈉。
4.過程簡(jiǎn)述
稱取混勻試樣約10g（W），注入干燥的錐形瓶中，加入乙醇10ml和石油醚60ml，搖動(dòng)，使試樣溶解后，緩慢加入80℃的蒸餾水80ml，振搖使成乳狀，滴入3滴甲基紅指示劑，趁熱逐滴加入0.02mol/L（1/2H2SO4）硫酸溶液，每加一滴振搖一次，滴至分層下的溶液顯出微紅色為止。
5.結(jié)果計(jì)算
油脂含皂量按下列公式計(jì)算：
含皂量（％）＝
V×N×0.304
×100
W
式中：V—— 滴定用去的硫酸溶液體積，ml；
N—— 硫酸溶液的（1/2H2SO4）摩爾濃度；
W——試樣重量，g；
0.304—— 每毫克摩爾（1/2H2SO4）硫酸相當(dāng)于油酸鈉的克數(shù)。
兩次試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過0.02％，求其平均數(shù)，即為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第二位。
6.來源：
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB5533—85
