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MPN (most probable number)法即最近似數(shù)法,也稱為最大可能數(shù)法,是食品檢驗中常用的方法.其生化反應基礎為乳糖發(fā)酵,革蘭陰性菌的無芽胞桿菌,如大腸菌群,一般在 37℃、24h 發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣.利用此原理,將供試液加到發(fā)酵培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)24h.若不產(chǎn)氣,則報告控制菌陰性;若產(chǎn)氣,則需劃線接種于平板上,37℃培養(yǎng)24h 后,觀察菌落形態(tài)、革蘭染色和重發(fā)酵驗證.
優(yōu)點:操作簡便、靈敏度較高,時間短,可直接觀察試管得出結(jié)論,若發(fā)酵培養(yǎng)基不產(chǎn)氣,24h 即可報告控制菌陰性.
缺點:要求樣品具有均一性,適合檢驗液體樣品,且只能用于檢驗在發(fā)酵培養(yǎng)基中產(chǎn)氣的菌種.注意事項:需選擇合適的稀釋度和接種量.
CFU(colony forming units)法即平板計數(shù)法,是食品和藥品檢驗中常用的方法.原理為lg 或lml 樣品中所含的活菌數(shù)量,通過將處理后的樣品在一定條件下培養(yǎng)后計算生長出來的菌落數(shù)(CFU),即在一定體積的細菌培養(yǎng)液在固態(tài)培養(yǎng)基上形成的菌落數(shù).液體樣品可直接稀釋成供試液,固體樣品需在滅菌的生理鹽水中浸泡制成供試液.將不同稀釋度的供試液吸取lml,放入滅菌的平皿內(nèi),再傾注融化的營養(yǎng)瓊脂,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,37℃培養(yǎng)4d,計算平皿內(nèi)的菌落數(shù).CFU法應用廣泛,但檢驗過程必須嚴格無菌,以防污染雜菌,而且檢驗所需時間較長,同時也需選擇合適的稀釋度和接種量.
