1、最重要的第一條,就是檢測器的線性響應(yīng)關(guān)系。
在所有的色譜檢測器中,除了FPD之外,所有的檢測器都遵從線性響應(yīng),也就是說m=KS。這里m指單位時(shí)間內(nèi)到達(dá)檢測器的待測物質(zhì)的量(包括質(zhì)量或物質(zhì)的量),K表示線性響應(yīng)系數(shù),S表示檢測器響應(yīng)信號的值。也就是說,檢測器響應(yīng)信號的大小與單位時(shí)間到達(dá)檢測器的被測物質(zhì)的總量成正比。當(dāng)然我們也知道,這個(gè)關(guān)系是有范圍的,量太大或者太小,都會(huì)脫離線性。
2、其次就是第二條,就是塔板理論。
塔板理論充分闡述了峰高與進(jìn)樣量之間的關(guān)系,或者說他們之間是成正比的。這個(gè)可以參考對塔板理論的說明。
根據(jù)這兩條,可以肯定的說待測物質(zhì)的峰高與待測物的進(jìn)樣總量成正比。或者利用微積分可以推斷出待測物質(zhì)的峰面積和待測物的進(jìn)樣總量成正比。既然峰高和峰面積都與進(jìn)樣總量成正比,為什么我們喜歡用峰面積,而不是更簡單的峰高呢?這個(gè)問題也很簡單,因?yàn)樗謇碚摬煌耆_,峰形經(jīng)常不完全滿足正態(tài)分布,所以峰高的代表性不足。
什么時(shí)候峰高能夠有良好的代表性?很明顯,峰形良好而且對稱,成良好的正態(tài)分布曲線形狀的時(shí)候,或者說峰形尖銳且對稱的時(shí)候。
色譜峰經(jīng)常拖尾,所以用峰面積定量就可以了,峰面積絕大多數(shù)情形下都具有很好的代表性。但是在檢測器超載,或模數(shù)轉(zhuǎn)換器超載,或峰面積積分不準(zhǔn),或進(jìn)樣代表性不足,以及一些其他特殊情形下,用峰面積也不能得到正確結(jié)果。但無論如何,用峰面積定量已經(jīng)是我們可實(shí)行的最準(zhǔn)確方法了。
色譜定量方法共四種:外標(biāo)法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法、內(nèi)加法(標(biāo)準(zhǔn)加入法)。
再細(xì)分歸一化法還可以分為百分比法,帶校正因子的歸一化法,部分歸一化法等。在這些定量方法中,百分比法和外標(biāo)法最簡單,內(nèi)加法最麻煩。