（一） 目的

 建立高壓滅菌鍋操作以及維護保養(yǎng)的標準程序，規(guī)范操作人員的操作，從而確保人員的安全及設備的正常運行。

（二） 范圍

適用于本所高壓蒸汽滅菌器滅菌效果的驗證。

（三） 職責

3.1 質(zhì)量負責人批準該驗證程序。 

3.2 質(zhì)量監(jiān)督員負責監(jiān)督該程序的實施。

3.3 檢驗人員負責該程序的實施，并做好相關記錄。

（四） 程序

4.1 檢驗人員按該程序?qū)嵤?/span>驗證，做好記錄，做出結果評價，上報質(zhì)量負責人。

4.2 以上驗證結果經(jīng)質(zhì)量負責人批準，以后高壓蒸汽滅菌器按驗證的方法操作。

（五）試驗步驟

高壓蒸氣滅菌器使物品滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的基本保證。高壓滅菌器滅菌效果是否合格足實驗成敗的最基礎最關鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓滅菌外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養(yǎng)基滅菌不徹底，直接關系到對藥品的無菌試驗結果。因此必須認真對高壓滅菌器進行滅菌效果的驗證。為此我們提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易可行的方法。

嗜熱脂肪芽胞桿菌

(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-105CFU/片。

5.1.2 121℃壓力蒸氣滅菌化學指示卡。

5.1.3 溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓滅菌20分鐘后備用。

5.1.4 0—150℃留點溫度計。

留點溫度計標化合格后方可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應存1℃之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。

滅菌后的菌片應在嚴格無菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽胞已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放入培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照。

化學指示卡上的指示色塊，在高壓蒸氣滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏�。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求。化學指示卡應在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。

高壓蒸氣滅菌必須使蒸氣順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2/3)。二種驗證各重復三次，共做六次。

5個點六次試驗表明溫度均在121℃，化學指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸氣滅菌效果合格。

5.3 驗證結果與評定

驗證結束后，驗證人員依據(jù)試驗結果對本次驗證做出評價和結論，并擬定高壓蒸汽滅菌器的操作規(guī)程和滅菌驗證頻次，上報質(zhì)量負責人。

5.4 質(zhì)量記錄

《高壓蒸汽滅菌效果驗證記錄》