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    常用的電泳緩沖液

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18

    緩沖液

    使用液

    濃貯存液(每升)

    tris-乙酸(tae)

    1×:0.04mol/l tris-乙酸

    50×:242g tris堿

     

    0.001mol/l edta

    57.1ml冰乙酸

       

    100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    tris-磷酸(tpe)

    1×:0.09mol/l tris-磷酸

    10×:10g tris堿

     

    0.002mol/l edta

    15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

       

    40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    tris-硼酸(tbe)a

    0.5×0.045mol/l tris-硼酸

    5×:54g tris堿

     

    0.001mol/l edta

    27.5硼酸

       

    20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    堿性緩沖液b

    1×:50mmol/l naoh

    1×:5ml 10mol/l naoh

     

    1mmol/l edta

    2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

    tris-甘氨酸c

    1×:25mmol/l tris

    5×:15.1g tris

     

    250mmol/l 甘氨酸

    94g 苷氨酸(電泳級)(ph8.3)

     

    0.1% sds

    50ml 10% sds(電泳級)

    說明:

    ①tbe溶液長時間存放后會形成沉淀物,為避免這一問題,可在室溫下用玻璃瓶保存5×溶液,出現(xiàn)沉淀后則予以廢棄。

    以片都以1×tbe作為使用液(即1:5稀釋濃貯液)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。但0.5×的使用液已具備足夠的緩沖容量。目前幾乎所有的瓊脂糖膠電泳都以1:10稀釋的貯存液作為使用液。

    進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠垂直槽的緩沖液槽較小, 故通過緩沖液的電流量通常較大,需要使用1×tbe以提供足夠的緩沖容量。

    ②堿性電泳緩沖液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

    ③tris-甘氨酸緩沖液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。

    2×sds凝膠加樣緩沖液:

    100mmol/l tris·hcl(6.8)

    200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)

    4%sds(電泳級)

    0.2%溴酚藍(lán)

    20%甘油

    不含dtt的2×sds凝膠加樣緩沖液可保存于室溫,應(yīng)在臨用前取1mol/l貯存液現(xiàn)加于上述緩沖液中。

     
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