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    食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

    HM43 葡萄球菌乳膠凝集試劑盒(HM43 HKM® STAPH)

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-08-04  來源:食品伙伴網(wǎng)整理
    核心提示:葡萄球菌乳膠凝集檢測(cè)試劑用于確證鑒定平板上分離出的可疑金黃色葡萄球菌菌落。

    一、用途

    葡萄球菌乳膠凝集檢測(cè)試劑用于確證鑒定平板上分離出的可疑金黃色葡萄球菌菌落。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。

     

    二、原理

    乳膠顆粒表面包被有纖維蛋白原(與凝固酶相結(jié)合)和免疫球蛋白(與A蛋白相結(jié)合)。與金黃色葡萄球菌菌懸液混合后,乳膠顆?裳杆倌。缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌不會(huì)發(fā)生明顯凝集。

     

    三、試劑盒組成成分 

                  M43        M433   

    REAG TEST 測(cè)試試劑 M43a 葡萄球菌乳膠試劑 5mL        5×5mL

    乳膠顆粒包被有人類纖維蛋白原和免疫球。含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(藍(lán)色瓶蓋)

    CONTROL +  陽性對(duì)照試劑 M43b 陽性對(duì)照  1mL     2×1mL

    無活性的金黃色葡萄球菌,含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(黑色瓶蓋)

     

    使用說明書

    檢測(cè)板

    攪拌棒

     

    需要的其它材料

    l  接種環(huán)

     

    四、警告和注意事項(xiàng)

    安全:

    1、試劑僅供體外診斷使用。

    2、試劑盒作防腐劑使用的疊氮化鈉可與鉛或銅制品反應(yīng)形成易爆的金屬疊氮化物。可用大量水沖洗以避免疊氮化物的堆積。

    3、使乳膠試劑敏感的免疫球蛋白和纖維蛋白原從人類血漿中提取,經(jīng)測(cè)試不含HIV-1, HIV-2HCV HbsAg抗體。但在使用過程中,依然應(yīng)遵循潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序。

    4、在處理或檢測(cè)可疑致病菌時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應(yīng)作中和處理。

    5、陽性對(duì)照液在生產(chǎn)中已作惰性處理,但在使用過程中依然應(yīng)遵循潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序。

     

    檢測(cè)過程:

    1、試劑盒應(yīng)按說明書使用。

    2、所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫。

    3、不要稀釋試劑盒內(nèi)的任何試劑。

    4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

    5、不要冷凍試劑盒內(nèi)的試劑。

    6、不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽性對(duì)照試劑或細(xì)菌樣品。

    7、注意凝集狀態(tài),呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實(shí)凝集。

    8、使用前應(yīng)確保檢測(cè)板清潔干燥。

     

    五、貯存及保質(zhì)期

    檢測(cè)試劑盒不使用時(shí)應(yīng)貯存在28℃,并應(yīng)在包裝盒標(biāo)簽上的有效期內(nèi)使用檢測(cè)試劑。

     

    六、樣本

    初步分離平板,如5%的血平板,經(jīng)3537℃培養(yǎng)1824小時(shí)后,選取12個(gè)金黃色葡萄球菌的可疑菌落,菌落應(yīng)作純度測(cè)試,以減少造成錯(cuò)誤的可能性。必要時(shí),可在另一平板中劃線純化菌落。菌落形態(tài)不典型時(shí),可作革蘭氏染色以提高測(cè)試菌落為葡萄球菌的可能性。

     

    七、檢測(cè)過程

    質(zhì)量控制:

    在每次使用檢測(cè)試劑盒前應(yīng)作下列質(zhì)量控制檢測(cè),以確證試劑的有效性。

    1、陽性對(duì)照的控制:滴1滴陽性對(duì)照試劑(M43b)于一個(gè)測(cè)試反應(yīng)環(huán)內(nèi),然后輕輕搖勻測(cè)試試劑(M43a),并滴1滴測(cè)試試劑于同一個(gè)測(cè)試反應(yīng)環(huán)內(nèi),不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽性對(duì)照試劑。用攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體,輕搖檢測(cè)板2分鐘后,應(yīng)觀察到凝集現(xiàn)象。如果未出現(xiàn)凝集反應(yīng),應(yīng)采用新鮮的檢測(cè)試劑盒。

    2、陰性控制:滴1滴混勻的測(cè)試試劑(M43a)于反應(yīng)環(huán)內(nèi),取新鮮的已知的缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌(如表皮葡萄球菌)培養(yǎng)1824小時(shí)的單菌落,與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的乳膠試劑混勻。搖動(dòng)檢測(cè)板2分鐘,應(yīng)無凝集發(fā)生。

     

    測(cè)試程序:

    1、輕輕搖勻乳膠測(cè)試試劑,滴1滴測(cè)試試劑于檢測(cè)板的一個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。

    2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取可疑菌落,與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的乳膠試劑混合并混勻。用1支干凈的攪拌棒將混勻液在整個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)涂布均勻。

    3、輕搖檢測(cè)板,在2分鐘內(nèi)觀察凝集結(jié)果。

    4、記錄結(jié)果后,將攪拌棒和檢測(cè)板進(jìn)行適當(dāng)?shù)南咎幚怼?/span>

     

    八、結(jié)果說明

    2分鐘內(nèi)出現(xiàn)凝集,表明測(cè)試菌落為金黃色葡萄球菌,如不出現(xiàn)凝集,表明測(cè)試菌落即不是金黃色葡萄球菌,也不是其它具有凝固酶/A蛋白的葡萄球菌。

     

    九、使用的局限性

    1、結(jié)果應(yīng)依據(jù)所有的臨床或?qū)嶒?yàn)室信息進(jìn)行判斷。

    2、測(cè)試應(yīng)為純菌落,如果菌落不純,可能造成錯(cuò)誤的結(jié)果。

    3、培養(yǎng)超過30小時(shí)后,可能形成自凝。

    4、高鹽培養(yǎng)基,如甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基,可抑制A蛋白的產(chǎn)生,可造成假陰性結(jié)果。

    5、葡萄球菌的粗糙菌株可引起假陽性結(jié)果。這類菌株較少見,并且可從菌落形態(tài)上加以區(qū)別。如果可疑時(shí),可用生理鹽水制成菌懸液并仔細(xì)觀察菌懸液的流暢性。

    6、纖維狀凝集可能為假陽性結(jié)果,應(yīng)作進(jìn)一步的生化鑒定。

    7、有些酵母菌株可能引起假陽性凝集結(jié)果。

    8、所有凝固酶陽性的葡萄球菌菌株可與葡萄球菌乳膠試劑反應(yīng)。因此金黃色葡萄球菌不易與中間葡萄球菌和豬葡萄球菌區(qū)分開。但這兩種菌株很少從人類分離出,一般在動(dòng)物或腐生生物中存在。

    9、乳膠凝集檢測(cè)為初步鑒定結(jié)果,所有的陽性結(jié)果的純培養(yǎng)物應(yīng)作進(jìn)一步的生化鑒定分析。

     

    十、檢測(cè)效果對(duì)比

    HKM® 葡萄球菌乳膠試劑盒與一種已廣泛使用的商業(yè)化的乳膠試劑盒檢測(cè)效果對(duì)比,用二種商品檢測(cè)121株金黃色葡萄球菌和其它葡萄球菌及56株潛在交叉反應(yīng)的菌株。

     

     

    HKM®

    總計(jì)

    陽性

    陰性

    另一已廣泛使用的乳膠試劑盒

    陽性

    63

    0

    63

    陰性

    0

    114

    114

    總計(jì)

    63

    114

    177

    靈敏度 63/63100%

    特異性 114/114100%

    一致性 177/177100%

    63株分離菌株中,9株在2種試劑盒均存在交叉反應(yīng)。它們分別為:差異檸檬酸桿菌1株、鮑氏不動(dòng)桿菌2株、斯氏普羅威登氏菌1株、蠟樣芽孢桿菌2株、產(chǎn)酸克雷伯1株、鏈球菌1株。以上所有交叉反應(yīng)的菌株中,均不會(huì)在葡萄球菌選擇性分離平板上生長或生長時(shí)菌落不會(huì)呈現(xiàn)典型的葡萄球菌菌落形態(tài)。蠟樣芽孢桿菌凝集時(shí)為非典型凝集(呈纖維狀)。

     

    十一、重復(fù)性

    批內(nèi)重復(fù)性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對(duì)照抗原及一組細(xì)菌樣品對(duì)同1批產(chǎn)品的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測(cè)。由不同的操作者隨機(jī)測(cè)試3次,最終效價(jià)由參照/對(duì)照抗原測(cè)定,并且3次定性分析結(jié)果完全一致。

    批間的重復(fù)性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對(duì)照抗原及一組細(xì)菌樣品對(duì)3批產(chǎn)品的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測(cè)。3個(gè)批次間,最終效價(jià)無顯著差異及定性分析結(jié)果為100%一致性。

    廣東環(huán)凱微生物科技有限公司  電話:020-32077703
    編輯:foodnews

     
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