1熱力消毒滅菌
高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和ø變性或凝固(結(jié)構(gòu)改變導致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達到消毒與滅菌的目的。在消毒中,熱可分為濕熱與干熱兩大類。
2干熱消毒滅菌
干熱是指相對濕度在20%以下的高熱。干熱消毒滅菌是由空氣導熱,傳熱效果較慢。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時可以殺死,芽胞需160-170℃經(jīng)2小時方可殺死。
燃燒法 :
是一種簡單、迅速、徹底的滅菌方法,因?qū)ξ锲返钠茐男源,故應用?Chi;有限。
燒灼法:
一些耐高溫的器械(金屬、搪瓷類),在急用或無條件用其他方法消毒時可采用此法。將器械放在火焰上燒灼1-2分鐘。若為搪瓷容器,可倒少量95%乙醇,慢慢轉(zhuǎn)動容器,使乙醇分布均勻,點火燃燒至熄滅約1-2分鐘。采集作細菌培養(yǎng)的標本時,在留取標本前后(即啟蓋后,閉蓋前)都應將試管(瓶)口和蓋子置于火焰上燒灼,來回旋轉(zhuǎn)2-3次。
燃燒時要注意安全,須遠離易燃易爆物品,如氧氣、汽油、乙醚等。燃燒過程不得添加乙醇,以免引起火焰上竄而致灼傷或火災。銳利刀剪為保護刀鋒,不宜用燃燒滅菌法。
焚燒
某些特殊感染,如破傷風、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料,以及其它已污染且無保留價值的物品,如污紙、垃圾等,應放入焚燒¯內(nèi)焚燒,使之炭化。
4電熱培養(yǎng)箱
利用培養(yǎng)箱的熱空氣消毒滅菌。培養(yǎng)箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對流,產(chǎn)生均一效應的熱空氣直接穿透物體。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時可以殺死,芽胞、病毒需160-170℃經(jīng)2小時方可殺死。熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑等。滅菌后待箱內(nèi)溫度降至50-40℃以下才能開啟柜門,以防炸裂。
5微波消毒
微波是一種高頻電磁波,其殺菌的作用原理,一為熱效應,所及之處產(chǎn)生分子內(nèi)部劇烈運動,使物體里外濕度迅速升高;一為綜合效應,諸如化學效應、電磁共振效應和場致力效應。目前已廣泛應用于食品、藥品的消毒,用微波滅菌手術(shù)器械包、微生物實驗室用品等亦有報告。若物品先經(jīng)1%過氧乙酸或0.5%新潔爾滅濕化處理后,可起協(xié)同殺菌作用,照射2分鐘,可使殺芽胞率由98.81%增加到99.98%-99.99%。
微波對人體有一定Σ害性,其熱效應可損傷睪丸、眼睛晶狀體等,長時間照射還可致神經(jīng)功能紊亂。使用時可設置不透微波的金屬屏障或戴特制防護眼鏡等。
6煮沸法
將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時,沸點可達105℃,能增強殺菌作用,還可去污防銹。在高原地區(qū)氣壓低、沸點低的情況下,要延長消毒時間(海拔ÿ增高300m,需延長消毒時間2分鐘)。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。
煮沸前物品涮洗干凈,打開軸節(jié)或蓋子,將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸。銳利、細小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時間均從水沸后開始計時。若中途再加入物品,則重新計時,消毒后及時取出物品,保持其無菌狀態(tài)。
7高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌器裝置嚴密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當壓力增至103-206kPa時,濕度可達121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌,公眾號“實驗室ISO17025”提醒,此法為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術(shù)器械、藥品、細菌培養(yǎng)基等。
潛熱是指當lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時,釋放出2255.2J的熱量。
高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問題是為熱的傳導提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因為冷空氣導熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達到應有的溫度。
8手提式高壓蒸汽滅菌器
為金屬圓筒,分為二層,隔層內(nèi)盛水,有蓋,可以旋緊,加熱后產(chǎn)生蒸汽。鍋外有壓力表,當蒸汽壓力升高時,溫度也隨之相應升高。該滅菌器體積小,可自發(fā)蒸汽,便于攜帶。
操作方法如下:在滅菌器中盛水3000ml;將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內(nèi);將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內(nèi)壁的的方管中;蓋好蓋子,š緊元寶螺絲,勿使©氣;鍋下加熱,打開排氣活門,放出冷空氣(一般在水沸后排氣10-15分鐘左右),關(guān)閉放氣活門,使壓力逐漸上升至103kPa,溫度達121.3℃,維持20分鐘后,排氣至“0”時,慢慢打開蓋子。如果突然開蓋,冷空氣大量進入,蒸汽凝成水滴,使物品潮濕,且玻璃類易發(fā)生爆裂。后再關(guān)閉放氣開關(guān),待夾層壓力表達到滅菌所需壓力時(約10分鐘后),將蒸汽控制閥移至“消毒”λ置,使蒸汽進入柜室 ,柜室內(nèi)的冷空氣及冷凝水可由柜室阻氣器排出,待柜室的壓力升到103-137kPa,溫度達121.3~126.2℃時,轉(zhuǎn)動壓力調(diào)節(jié)閥,使壓力與溫度保持恒定。維持30分鐘后,將蒸汽控制閥移至“排氣”λ置,排氣畢,將蒸汽控制閥移至“干燥”λ置;物品干燥后,將蒸氣控制閥移至“關(guān)閉”λ置,待壓力指針到“0”λ置和熱空氣排盡后,才能打開柜門,取出物品;關(guān)緊進氣閥。
9臥式高壓蒸汽滅菌器
其結(jié)構(gòu)原理同手提式高壓蒸汽滅菌器,因其體積大,一次可滅菌大量物品。操作人員須經(jīng)專業(yè)培訓,合格后方能上崗。
10預真空式高壓蒸汽滅菌器
在通入蒸汽前有一預處理階段,即柜室內(nèi)抽負壓至2.6kPa(空氣排除約98%),所以,預真空高壓蒸汽滅菌器除有下排氣式所具備的滅菌系統(tǒng)、蒸汽輸送系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、安全系統(tǒng)和儀表監(jiān)測指示系統(tǒng)外,增加抽負壓系統(tǒng)和空氣過濾系統(tǒng)。機器運轉(zhuǎn)由電腦控制。
11紫外線消毒
在室溫20℃~25℃時,220V 30W紫外燈下方垂直λ置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強度應70W/cm2,低于此值時應更換,提醒,適當數(shù)量的紫外燈,確保平均ÿ立方米應不少于1.5W。紫外線消毒時,無菌室內(nèi)應保持清潔干燥。在無人條件下,可采取紫外線消毒,作用時間應30min,室內(nèi)濕度20%或40%、相對濕度大于60%時,應適當延長照射時間。用紫外線消毒物品表面時,應使照射表面受到紫外線的直接照射,且應達到足夠的照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。
12臭氧消毒
封閉無菌室內(nèi),無人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時間應30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時方可入內(nèi)作業(yè)。
13甲醛消毒
按照甲醛(40%)10毫升/立方米、高錳酸鉀5克/立方米計算用量。不同情況下,用量有所不同,但比例為2:1。盛藥容器要大、耐熱、耐腐蝕:一般用陶瓷或玻璃容器,因為高錳酸鉀和甲醛都具有腐蝕性,且混合后反應劇烈,釋放熱量。房間要密閉:這樣熏蒸效果才會好。容器應盡量靠近門,以便操作人員迅速撤離;先將溫水倒入容器內(nèi),后加入高錳酸鉀,攪拌均勻;再加入甲醛;加入甲醛后人立即離開,密閉房間。注意順序:是將甲醛倒入高錳酸鉀溶液內(nèi)。消毒時間一般為20-30分鐘。消毒后要打開門窗通風換氣。
這里說的甲醛就是40%的甲醛溶液,也就是福爾馬林,一般包裝上寫的是37%。公眾號“實驗室ISO17025”提醒,甲醛對人體Σ害太大了,一般不推薦這種方法。
可以考慮用40%乳酸熏蒸,效果很不錯的。
14乳酸重蒸法消毒
室內(nèi)溫度22 ℃,濕度75%~90%,按0.6 g/m3乳酸量共用9.6 g進行室內(nèi)熏蒸,使蒸汽彌散全室,密閉門窗1 h。
文章(文字)來源:實驗室ISO17025
高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和ø變性或凝固(結(jié)構(gòu)改變導致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達到消毒與滅菌的目的。在消毒中,熱可分為濕熱與干熱兩大類。
2干熱消毒滅菌
干熱是指相對濕度在20%以下的高熱。干熱消毒滅菌是由空氣導熱,傳熱效果較慢。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時可以殺死,芽胞需160-170℃經(jīng)2小時方可殺死。
燃燒法 :
是一種簡單、迅速、徹底的滅菌方法,因?qū)ξ锲返钠茐男源,故應用?Chi;有限。
燒灼法:
一些耐高溫的器械(金屬、搪瓷類),在急用或無條件用其他方法消毒時可采用此法。將器械放在火焰上燒灼1-2分鐘。若為搪瓷容器,可倒少量95%乙醇,慢慢轉(zhuǎn)動容器,使乙醇分布均勻,點火燃燒至熄滅約1-2分鐘。采集作細菌培養(yǎng)的標本時,在留取標本前后(即啟蓋后,閉蓋前)都應將試管(瓶)口和蓋子置于火焰上燒灼,來回旋轉(zhuǎn)2-3次。
燃燒時要注意安全,須遠離易燃易爆物品,如氧氣、汽油、乙醚等。燃燒過程不得添加乙醇,以免引起火焰上竄而致灼傷或火災。銳利刀剪為保護刀鋒,不宜用燃燒滅菌法。
焚燒
某些特殊感染,如破傷風、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料,以及其它已污染且無保留價值的物品,如污紙、垃圾等,應放入焚燒¯內(nèi)焚燒,使之炭化。
4電熱培養(yǎng)箱
利用培養(yǎng)箱的熱空氣消毒滅菌。培養(yǎng)箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對流,產(chǎn)生均一效應的熱空氣直接穿透物體。一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時可以殺死,芽胞、病毒需160-170℃經(jīng)2小時方可殺死。熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑等。滅菌后待箱內(nèi)溫度降至50-40℃以下才能開啟柜門,以防炸裂。
5微波消毒
微波是一種高頻電磁波,其殺菌的作用原理,一為熱效應,所及之處產(chǎn)生分子內(nèi)部劇烈運動,使物體里外濕度迅速升高;一為綜合效應,諸如化學效應、電磁共振效應和場致力效應。目前已廣泛應用于食品、藥品的消毒,用微波滅菌手術(shù)器械包、微生物實驗室用品等亦有報告。若物品先經(jīng)1%過氧乙酸或0.5%新潔爾滅濕化處理后,可起協(xié)同殺菌作用,照射2分鐘,可使殺芽胞率由98.81%增加到99.98%-99.99%。
微波對人體有一定Σ害性,其熱效應可損傷睪丸、眼睛晶狀體等,長時間照射還可致神經(jīng)功能紊亂。使用時可設置不透微波的金屬屏障或戴特制防護眼鏡等。
6煮沸法
將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時,沸點可達105℃,能增強殺菌作用,還可去污防銹。在高原地區(qū)氣壓低、沸點低的情況下,要延長消毒時間(海拔ÿ增高300m,需延長消毒時間2分鐘)。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。
煮沸前物品涮洗干凈,打開軸節(jié)或蓋子,將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸。銳利、細小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時間均從水沸后開始計時。若中途再加入物品,則重新計時,消毒后及時取出物品,保持其無菌狀態(tài)。
7高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌器裝置嚴密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當壓力增至103-206kPa時,濕度可達121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌,公眾號“實驗室ISO17025”提醒,此法為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術(shù)器械、藥品、細菌培養(yǎng)基等。
潛熱是指當lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時,釋放出2255.2J的熱量。
高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問題是為熱的傳導提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因為冷空氣導熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達到應有的溫度。
8手提式高壓蒸汽滅菌器
為金屬圓筒,分為二層,隔層內(nèi)盛水,有蓋,可以旋緊,加熱后產(chǎn)生蒸汽。鍋外有壓力表,當蒸汽壓力升高時,溫度也隨之相應升高。該滅菌器體積小,可自發(fā)蒸汽,便于攜帶。
操作方法如下:在滅菌器中盛水3000ml;將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內(nèi);將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內(nèi)壁的的方管中;蓋好蓋子,š緊元寶螺絲,勿使©氣;鍋下加熱,打開排氣活門,放出冷空氣(一般在水沸后排氣10-15分鐘左右),關(guān)閉放氣活門,使壓力逐漸上升至103kPa,溫度達121.3℃,維持20分鐘后,排氣至“0”時,慢慢打開蓋子。如果突然開蓋,冷空氣大量進入,蒸汽凝成水滴,使物品潮濕,且玻璃類易發(fā)生爆裂。后再關(guān)閉放氣開關(guān),待夾層壓力表達到滅菌所需壓力時(約10分鐘后),將蒸汽控制閥移至“消毒”λ置,使蒸汽進入柜室 ,柜室內(nèi)的冷空氣及冷凝水可由柜室阻氣器排出,待柜室的壓力升到103-137kPa,溫度達121.3~126.2℃時,轉(zhuǎn)動壓力調(diào)節(jié)閥,使壓力與溫度保持恒定。維持30分鐘后,將蒸汽控制閥移至“排氣”λ置,排氣畢,將蒸汽控制閥移至“干燥”λ置;物品干燥后,將蒸氣控制閥移至“關(guān)閉”λ置,待壓力指針到“0”λ置和熱空氣排盡后,才能打開柜門,取出物品;關(guān)緊進氣閥。
9臥式高壓蒸汽滅菌器
其結(jié)構(gòu)原理同手提式高壓蒸汽滅菌器,因其體積大,一次可滅菌大量物品。操作人員須經(jīng)專業(yè)培訓,合格后方能上崗。
10預真空式高壓蒸汽滅菌器
在通入蒸汽前有一預處理階段,即柜室內(nèi)抽負壓至2.6kPa(空氣排除約98%),所以,預真空高壓蒸汽滅菌器除有下排氣式所具備的滅菌系統(tǒng)、蒸汽輸送系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、安全系統(tǒng)和儀表監(jiān)測指示系統(tǒng)外,增加抽負壓系統(tǒng)和空氣過濾系統(tǒng)。機器運轉(zhuǎn)由電腦控制。
11紫外線消毒
在室溫20℃~25℃時,220V 30W紫外燈下方垂直λ置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強度應70W/cm2,低于此值時應更換,提醒,適當數(shù)量的紫外燈,確保平均ÿ立方米應不少于1.5W。紫外線消毒時,無菌室內(nèi)應保持清潔干燥。在無人條件下,可采取紫外線消毒,作用時間應30min,室內(nèi)濕度20%或40%、相對濕度大于60%時,應適當延長照射時間。用紫外線消毒物品表面時,應使照射表面受到紫外線的直接照射,且應達到足夠的照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。
12臭氧消毒
封閉無菌室內(nèi),無人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時間應30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時方可入內(nèi)作業(yè)。
13甲醛消毒
按照甲醛(40%)10毫升/立方米、高錳酸鉀5克/立方米計算用量。不同情況下,用量有所不同,但比例為2:1。盛藥容器要大、耐熱、耐腐蝕:一般用陶瓷或玻璃容器,因為高錳酸鉀和甲醛都具有腐蝕性,且混合后反應劇烈,釋放熱量。房間要密閉:這樣熏蒸效果才會好。容器應盡量靠近門,以便操作人員迅速撤離;先將溫水倒入容器內(nèi),后加入高錳酸鉀,攪拌均勻;再加入甲醛;加入甲醛后人立即離開,密閉房間。注意順序:是將甲醛倒入高錳酸鉀溶液內(nèi)。消毒時間一般為20-30分鐘。消毒后要打開門窗通風換氣。
這里說的甲醛就是40%的甲醛溶液,也就是福爾馬林,一般包裝上寫的是37%。公眾號“實驗室ISO17025”提醒,甲醛對人體Σ害太大了,一般不推薦這種方法。
可以考慮用40%乳酸熏蒸,效果很不錯的。
14乳酸重蒸法消毒
室內(nèi)溫度22 ℃,濕度75%~90%,按0.6 g/m3乳酸量共用9.6 g進行室內(nèi)熏蒸,使蒸汽彌散全室,密閉門窗1 h。
文章(文字)來源:實驗室ISO17025