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    【解讀】維生素B1的前處理,精華都在這里了!

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-11-16
    核心提示:在我們買的食品中都會(huì)看到一個(gè)營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽,有時(shí)會(huì)在標(biāo)簽中看到維生素B1的含量,接下來(lái)就讓我們了解一下維生素檢測(cè)前處理的步驟吧。
    試劑配制

    20g/l的鐵氰化鉀溶液:稱取1g鐵氰化鉀,先用少量的水溶解后再定容至50ml。

    100g/l的氫氧化鈉溶液:稱取10g氫氧化鈉,加水溶解后定容至100ml。

    堿性鐵氰化鉀:將上述的5ml鐵氰化鉀和100ml的氫氧化鈉混合均勻后備用(現(xiàn)用現(xiàn)配)。

    0.1mol/l的鹽酸溶液:準(zhǔn)確移取8.5ml濃鹽酸,加水稀釋至1000ml。

    2.0mol/l乙酸鈉溶液:稱取27.1g乙酸鈉,用水溶解后定容至100ml

    混合酶溶液:稱取1.76g木瓜蛋白酶和1.27g淀粉酶,加水定容至50ml,渦旋混勻后冷藏密封保存,臨用時(shí)現(xiàn)取。

     

    樣品提取

    1.稱取5g(精確至0.01g)固體試樣或10g液體試樣于帶塞子的錐形瓶中,加60ml0.1mol/l的鹽酸溶液,充分搖勻后塞上塞子,高壓滅菌鍋中121℃,30min.冷卻至常溫后搖勻。

    2.用2.0mol/l的乙酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH至4.0左右,準(zhǔn)確移取2.0ml混合酶溶液,搖勻后放入培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)16h。

    3.將溶液用漏斗全部移至100ml容量瓶中,定容至刻度,搖勻后過(guò)濾。

    試液制備

    1.準(zhǔn)確移取濾液2.0ml至10ml的離心管中,加入1.0ml的堿性鐵氰化鉀溶液,渦旋混勻后,加入2.0ml的正丁醇,渦旋1.5min后離心五分鐘。

    2.吸取上層經(jīng)0.45μm有機(jī)微孔濾膜過(guò)濾,取濾液2ml放入棕色進(jìn)樣瓶中待測(cè)。

     

    其他

    到這一步維生素B1的前處理就完成了,特別要注意以下幾點(diǎn):

    1.混合蛋白酶和堿性鐵氰化鉀要現(xiàn)用現(xiàn)配,曾經(jīng)小編這里就出現(xiàn)過(guò)蛋白酶密封放冰箱三天就會(huì)變臭,可能是因?yàn)槊富钚愿撸菀鬃冑|(zhì)。

    2.一定不要忘記加1.0ml堿性鐵氰化鉀,否則不出峰。

    3.離心之前一定要渦旋1.5min,或者手動(dòng)搖勻1.5min,使維生素B1充分提取出來(lái)。

    4.拔針頭時(shí)注意安全,使用完后將針頭蓋好,保護(hù)他人安全。

    文章由小編編輯整理,參考GB 5009.84-2016,轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。

    編輯:songjiajie2010

     
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