分子結(jié)構(gòu)中含有還原性基團(tuán)(如游離醛基或游離酮基)的糖,叫還原糖。如葡萄糖。
果糖含有游離的酮基,所以果糖也屬于還原糖。
還原性質(zhì)
一般情況下,單糖的還原能力主要來自它的醛基,如葡萄糖,而多糖則大多因?yàn)?/span>半縮醛羥基的存在。還原后,自己會變成糖酸。如葡萄糖就會變成葡萄糖酸。
如該糖是酮糖,羰基就會斷裂,分解成兩個(gè)較小的分子,如果糖。
所有單糖(除二羥丙酮)及大部分二糖(除蔗糖等)在本尼迪克特試驗(yàn)中呈陽性反應(yīng),所以大部分單糖及二糖都具有還原性。
還原糖直接滴定法原理
試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,以亞甲藍(lán)作指示劑,在加熱條件下滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液(已用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定),根據(jù)樣品液消耗體積計(jì)算還原糖含量。
還原糖滴定注意事項(xiàng)
一、堿性酒石酸甲、乙液與還原糖反應(yīng)是定量關(guān)系,它們的多少直接影響測定結(jié)果的多少,從而影響檢測數(shù)據(jù),所以堿性酒石酸甲、乙液必須精確吸取,保證每次取樣量一致。
影響堿性酒石酸銅甲、乙液吸取誤差的因素:
1、堿性酒石酸銅甲、乙液在吸管中刻度液面的位置要保持一致。
2、吸管外壁殘留的液體多少會造成堿性酒石酸甲、乙液取樣量的誤差,所以要習(xí)慣性的對吸管外壁的堿性酒石酸甲、乙液進(jìn)行相同處理,保證每次外壁殘留液相對一致,從而減少液體取樣量的誤差。
3、堿性酒石酸銅甲、乙液放入三角瓶的速度保持一致(不可吹),放完后要觀察其殘留在吸管中有多少,要保證每次殘留一致。
4、堿性酒石酸銅甲、乙液的不是很明顯的沉淀(或濃度變化)也會對測定造成波動,取堿性酒石酸銅甲液的器具切記不要與堿性物質(zhì)接觸(同時(shí)也要注意防止帶入堿性物質(zhì)于甲液中),以避免甲液產(chǎn)生沉淀,盛甲液的容器時(shí)間長了,內(nèi)壁上也會殘留固體(硫酸銅),這些固體顆粒也會造成檢測誤差。
二、滴定速度要保持均衡一致,趁熱以每2秒一滴的速度滴定為好(速度不要受滴定時(shí)間的長短而改變)。
三、試樣溶液滴定時(shí)要進(jìn)行預(yù)測,正式測定時(shí)從滴定管滴加比預(yù)測體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶中,控制在2min中內(nèi)加熱至沸,保持沸騰以1滴/2s的速度滴定至終點(diǎn)。
四、電爐的溫度對檢測結(jié)果也有影響,所以要保證電爐充分預(yù)熱,同時(shí)三角瓶在電爐上的放置位置要保持一致。
五、測定時(shí)液體沸騰后的開始滴定的時(shí)間也要保持一致2min內(nèi),一般等液體充分沸騰后開始滴定。
六、滴定終點(diǎn)的判斷也要保持一致。等液體藍(lán)色剛好褪去為為滴定終點(diǎn)。
七、糖液稀釋及取樣也要注意精確,注意吸管正確使用方法。
八、滴定過程中最好佩戴面罩和口罩以防沸騰液體噴濺或是發(fā)生三角爆裂等。
九、注意滴定管漏液、變形,滴定管尖端氣泡等對檢測數(shù)值的影響。
十、三角瓶使用后清洗干凈。
十一、滴定開始前可以在空白三角瓶和樣品三角瓶內(nèi)加入幾粒小顆粒玻璃珠,促進(jìn)樣品受熱均勻以及防爆裂。
十二、如果溶液中還原糖含量較低,產(chǎn)生的氧化亞銅便會較少,試驗(yàn)后只會有綠色、混濁的黃色或橙色等。
十三、在酸性環(huán)境中,Cu2 會變得較為穩(wěn)定,不容易發(fā)生反應(yīng),所以不能進(jìn)行試驗(yàn)。
十四、醇和醛在這測試亦會產(chǎn)生磚紅色沉淀物,因?yàn)閮烧叨季哂性谶@試驗(yàn)中產(chǎn)生作用的官能團(tuán)。