不需要。儀器測(cè)出來(lái)標(biāo)準(zhǔn)系列的響應(yīng)值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應(yīng)值來(lái)做,工作中我們也常用0管來(lái)做儀器調(diào)零。其實(shí)沒有必要那么麻煩,即使空白或0管有響應(yīng)值,在構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),我們已經(jīng)認(rèn)為該響應(yīng)值就是0濃度,也就是扣除了這個(gè)空白的。
標(biāo)準(zhǔn)曲線需要人為的增加(0,0)點(diǎn)嗎?
不能。通常的標(biāo)準(zhǔn)系列多是配制0,1,2,3mg/L系列這樣的說法,沒做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0)很不妥,因?yàn)楹芏鄷r(shí)候0管進(jìn)入儀器可能也有響應(yīng)值,這也是我們考察試劑空白的一個(gè)重要步驟。這個(gè)0管在某些時(shí)候非常重要,比如全血鉛測(cè)定,我們采用牛血清來(lái)基體匹配標(biāo)準(zhǔn)系列,如果此時(shí)你用酸做空白或沒做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0),那你就很難做好標(biāo)準(zhǔn)曲線。所以標(biāo)準(zhǔn)曲線的0管也是做好標(biāo)準(zhǔn)曲線的重要考慮點(diǎn)。
什么時(shí)候用Y=bX和二次曲線呢?
標(biāo)準(zhǔn)曲線我們通常采用的是Y=a+bX,曲線擬合完必須要做統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn),且要做統(tǒng)計(jì)完備的線性檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn),然后再做a與0的差別檢驗(yàn),如果a與0的統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差異,你就可以考慮用Y=bX的擬合曲線,擬合出來(lái)后同樣做線性檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn),如果線性檢驗(yàn)合格(P<0.05)且失擬檢驗(yàn)合格(p>0.05),此時(shí)你就可以采用Y=bX。二次曲線的采用同樣是這樣的道理,如果你Y=a+bX時(shí)擬合不合格,你就考慮用Y=a+bX+cX2,同樣做失擬檢驗(yàn),考察擬合的符合情況。如果Y=a+bX和Y=a+bX+cX2都滿足擬合檢驗(yàn)和失擬檢驗(yàn)合格,則采用Y=a+bX形式,這樣符合統(tǒng)計(jì)學(xué)上參數(shù)最少的統(tǒng)計(jì)簡(jiǎn)潔性原則。
標(biāo)準(zhǔn)曲線去查含量時(shí)是先減空白信號(hào)算樣品含量還是先算出空白含量相減?
工作中我們常要減掉空白得到樣品含量,現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法有的推薦先算出空白含量,用樣品含量相減,也有推薦先用樣品信號(hào)減空白信號(hào)然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量。而且這兩種算法常常差距很大。其實(shí)這種差距往往是低含量水平時(shí)才出現(xiàn),在低含量水平通過標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量時(shí),本身不確定度就很大。這兩種方法都可以。個(gè)人推薦先用樣品信號(hào)減空白信號(hào)然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量,因?yàn)檫@樣出來(lái)的含量不確定度要小一些,而先算出空白含量再相減就增加了1次標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量時(shí)的不確定度,因?yàn)楹玫臏y(cè)量永遠(yuǎn)是不確定度小的測(cè)量。
標(biāo)準(zhǔn)系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液體積取用中有效數(shù)字該如何寫呢?
標(biāo)準(zhǔn)溶液體積取用的有效數(shù)字跟你采用的體積量具有直接關(guān)系。比如說量取或準(zhǔn)確量取等字眼,10mL和10.0mL提示你要采用不同的量具。當(dāng)我們使用某個(gè)量具完成某次體積取用后,讀數(shù)是按照量具的最小允差決定的,而最小允差是針對(duì)最小分度線而言的。當(dāng)取用10mL體積時(shí),如果用A級(jí)10mL的分度吸管,那么10.0mL應(yīng)該是確定的,因?yàn)樗姆侄染為0.1mL。當(dāng)取用1mL體積時(shí),如果用A級(jí)1mL的分度吸管,那么1.00mL應(yīng)該是確定的,因?yàn)樗姆侄染為0.01mL。所以我個(gè)人意見,到底寫10.00還是10.0以最小分度線來(lái)確定,最小分度線以下的都為估讀。如果你認(rèn)為估讀也是有效數(shù)字的話,10.00mL也可以,因?yàn)榇藭r(shí)的容量允差為0.05mL,但1.000mL就沒有太大意義了,因?yàn)锳級(jí)1mL的分度吸管的容量允差已經(jīng)是0.008mL了。
如何做兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)?zāi)兀?/span>
先從原理上講:判斷兩條或多條標(biāo)準(zhǔn)曲線的差異,須檢驗(yàn)殘差,截距和斜率三項(xiàng),分別有不同的統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù),殘差用F檢驗(yàn),截距和斜率采用較為復(fù)雜的統(tǒng)計(jì)量。
從實(shí)際操作講:多用協(xié)方差分析檢驗(yàn)截距和斜率的差異,以SPSS為例:
1.先重新整理數(shù)據(jù),將y2數(shù)據(jù)列加到y(tǒng)1下面,變成一個(gè)變量y;將x2數(shù)據(jù)列加到x1下面,變成一個(gè)變量x;然后再設(shè)定一個(gè)新的分組變量group,原來(lái)第1組值為1,第2組值為2。
2.進(jìn)行協(xié)方差分析(第一步分析斜率是否無(wú)差異)。Analyze->GeneralLinear Model->Univariate Dependent List:填入y---------將y做為因變量 Fixed Factor:填入group Covaraites:填入x--------將x做為協(xié)變量 Model:選Custom Model:填入 x groupx*group---------注意如果變量填入順序不一樣,結(jié)果也會(huì)不一樣。Sum ofsquares下拉列表框:選TypeI 然后點(diǎn)擊ok,看結(jié)果里x*group這一行的Sig。P值,若大于0.05,則接受原假設(shè),即兩條回歸直線的斜率無(wú)差異,否則拒絕。
3.再來(lái)進(jìn)行截距的無(wú)差異分析其實(shí)過程跟上面一樣,只是Model里去掉了x*group交叉項(xiàng)。Analyze->GeneralLinear Model->Univariate Dependent List:填入y---------將y做為因變量 Fixed Factor:填入group Covaraites:填入x--------將x做為協(xié)變量 Model:選Custom Model:填入 x group ---------注意如果變量填入順序不一樣,結(jié)果也會(huì)不一樣。Sum of squares下拉列表框:選TypeI 點(diǎn)擊ok后,看group一行的Sig。P值,若P值大于0.05說明兩條回歸直線截距也無(wú)差異,若小于0.05說明截距是有差異的。