1、培養(yǎng)基煮沸溶解后再高壓滅菌，還是直接高壓滅菌存在疑惑。

拿麥康凱瓊脂舉個(gè)例子，溶解后滅菌，平板上沒有不溶的結(jié)晶紫，沒有紫色的斑點(diǎn)；相對(duì)比未溶解滅菌的，平板上有結(jié)晶紫和紫色的斑點(diǎn)。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。

2、培養(yǎng)基PH值為什么不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)？

其實(shí)出現(xiàn)這個(gè)情況的問題有很多種，大致我分為這么6大點(diǎn)：

①質(zhì)量不好（生產(chǎn)廠家出廠時(shí)pH就不正確）；

②滅菌問題（高壓滅菌溫度過高或滅菌時(shí)間過長(zhǎng)，導(dǎo)致葡萄糖類焦化從而pH降低）；

③保存時(shí)間（超過保質(zhì)期或結(jié)塊）；

④水質(zhì)出現(xiàn)問題（可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水）；

⑤保存溫度（保存溫度過高）；

⑥光線直射總結(jié)本人認(rèn)為以上6點(diǎn)都可能導(dǎo)致培養(yǎng)基pH出現(xiàn)偏差，如果出現(xiàn)此類問題，建議逐一排查，直到問題解決。

3、培養(yǎng)基高壓滅菌時(shí)為什么會(huì)焦化？

不少檢驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基有焦化現(xiàn)象，我認(rèn)為引起此現(xiàn)象的主要原因有以下4點(diǎn)：

①可能你滅菌的時(shí)候溫度超過了121℃（正常115-116℃20min即可）；

②滅菌時(shí)間過長(zhǎng)；

③培養(yǎng)基在容器中裝的太多（不要超過容器容量的80%）；

④滅完菌的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中保存的時(shí)間過長(zhǎng)，這些都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基發(fā)生焦化現(xiàn)象。

4、培養(yǎng)基PH怎么測(cè)定？

通常分兩種情況：

①對(duì)于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，先煮沸溶解后再冷卻至25℃時(shí)，測(cè)定其pH值（固體培養(yǎng)基至少測(cè)2個(gè)點(diǎn)，取其平均值）；

②對(duì)于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，高壓滅菌后，冷卻至25℃測(cè)其pH（固體培養(yǎng)基至少測(cè)2個(gè)點(diǎn)，取其平均值）。

5、含瓊脂培養(yǎng)基在倒平板為什么有時(shí)候不凝固或凝固不好？

針對(duì)以上情況，我做了分析：

①針對(duì)需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，倒平板時(shí)候要先搖勻（因?yàn)榄傊�分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底部，導(dǎo)致瓊脂分散不均勻）；

②針對(duì)無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，一次煮沸溶解后不能直接倒平板，應(yīng)重復(fù)煮沸溶解3-5次（因?yàn)橐淮尾荒艽_保瓊脂完全溶解）。

6、為什么同一品牌的不同批號(hào)，粉末顏色有差別？

分析可能有3個(gè)原因：

①此培養(yǎng)基成分含有染料或指示劑；

②不同批次粉末培養(yǎng)基含水量不同，一般要求≤6%，含水量越高，顏色越深；

③加工時(shí)球磨時(shí)間越長(zhǎng)顏色越深。

此次分享，主要是對(duì)微生物培養(yǎng)基使用這塊會(huì)遇到的常見問題進(jìn)行簡(jiǎn)單分析，希望通過短短幾行字，能夠幫助廣大在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)過此類問題的同仁，其中若有不對(duì)的地方忘諸位指正，謝謝！