11、計(jì)算稱量
根據(jù)待檢樣品屬性計(jì)算出所需的不同培養(yǎng)基的體積,根據(jù)說明書進(jìn)行準(zhǔn)確稱量;電子天平需開機(jī)預(yù)熱30min后使用,稱量過程中手要穩(wěn),避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中,若灑落,應(yīng)立即停止稱量,使用潔凈布擦干粉末,重新調(diào)“0”后稱量。
對(duì)于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中;不易溶解的培養(yǎng)基,先加入少量純化水振搖溶解后,二次加水配制;需分裝的培養(yǎng)基,需完全溶解,含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化,完全溶解后,分裝至不同容器中進(jìn)行滅菌。
如果要制作斜面培養(yǎng)基,須將培養(yǎng)基分裝于試管中。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體、半固體培養(yǎng)基,則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí),一手捏松彈簧夾,使培養(yǎng)基流出,另一只手握住幾支試管或錐形瓶,依次接取培養(yǎng)基。分裝時(shí),注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,以免引起雜菌污染。裝入試管的培養(yǎng)基量,視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養(yǎng)基時(shí),每只15×150毫米的試管,約裝3~4毫升(1/4~1/3試管高度),如制作深層培養(yǎng)基,每只20×220毫米的試管約裝12~15毫升。
分裝完畢后,需要用硅膠塞堵住管口或瓶口。主要目的是過濾空氣,避免污染。不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。塞入管口或瓶口中的硅膠塞,應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿褶皺侵入,塞好后,以手提塞,管、瓶不下落為合適;硅膠塞的2/3應(yīng)在管內(nèi),上端露出少許便于拔取。
塞好塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上牛皮紙用繩扎緊,同時(shí)貼上標(biāo)簽,注明培養(yǎng)基的名稱、組別、配制日期后,準(zhǔn)備滅菌。
根據(jù)培養(yǎng)基說明書規(guī)定的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌。滅菌后,如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。