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    分享|微生物檢驗中菌落總數(shù)的不確定度評定!

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2020-09-09
    核心提示:在ISO/IEC17025《校準(zhǔn)和檢測實驗室能力的通用要求》中明確指出實驗室出具的檢測報告應(yīng)包含有關(guān)評定校準(zhǔn)或測試結(jié)果的不確定度說明
     在ISO/IEC17025《校準(zhǔn)和檢測實驗室能力的通用要求》中明確指出實驗室出具的檢測報告應(yīng)包含有關(guān)評定校準(zhǔn)或測試結(jié)果的不確定度說明,故對測量結(jié)果進行不確定度的評定成為檢測實驗室的重要內(nèi)容。本文試對微生物檢驗中菌落總數(shù)檢測項目的檢測結(jié)果作不確定度評定。

     

     

    1 .檢驗方法

    依據(jù) GB 4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》中要求以無菌操作取檢樣25g(mL)剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中,經(jīng)振搖或研磨做成1︰10的均勻稀釋樣液,按照標(biāo)準(zhǔn)要求制備10倍系列稀釋樣品勻液。根據(jù)污染情況的估計,選擇2~3個稀釋度,每個稀釋度作2個平皿,每個平皿注入培養(yǎng)基約15~20mL,并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使混合均勻,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置36℃±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h±2h。計數(shù)后以同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)報告。

     

    2. 數(shù)學(xué)模型

    設(shè)菌落總數(shù)為A,檢測結(jié)果為X,則A=X CFU/g(mL)。

     

    3 .計算不確定度
    3.1 在微生物檢驗中,樣品中細菌分布的均勻性和重復(fù)測量帶來的不確定度是影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確度的主要原因,而B類不確定度分量對合成不確定度影響較少。按 GB 4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》中方法,同一樣品每個稀釋度作兩個平衡樣,因此可以采用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差求檢測結(jié)果的不確定度 見表1。

    3.2 從檢驗結(jié)果可知,如直接用貝塞爾公式計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差,由于數(shù)據(jù)的散發(fā)性較大,計算出的合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差很大,當(dāng)樣本均值較小時其不確定度則會過大,此時可以對上述數(shù)據(jù)取對數(shù)后,計算出樣本檢驗結(jié)果對數(shù)值的均值和殘差,將中間計算結(jié)果 見表2。根據(jù)貝賽爾公式,可計算出檢測結(jié)果對數(shù)值的合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差:

    取置信水平P=95%,自由度ν=19,查t分布表得:

    分布于X±0.043之間。當(dāng)檢測結(jié)果以平衡樣結(jié)果平均值表示時,相對于對數(shù)值的取值再取反對數(shù)得其取值區(qū)間。這個取值區(qū)間適合于任何一次檢測。

    3.3 例1、3#樣品,對數(shù)值的平均值為2.708,取值區(qū)間為2.665~2.751,取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為462~564 CFU/g(mL),菌落總數(shù)的取值區(qū)間為460~560CFU/g(mL

    例2、12#樣品,對數(shù)值的平均值為3.203,取值區(qū)間為3.160~3.246,取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為1445~1762u/g(mL),菌落總數(shù)的取值區(qū)間為1400~1800CFU/g(mL。

    例3:18#樣品,對數(shù)值的平均值為4.0115,取值區(qū)間為3.9685~4.0545,取反對數(shù)得平衡樣平均值的取值區(qū)間為9300~11337 u/g(mL),菌落總數(shù)的取值區(qū)間為9300~11000CFU/g(mL。

     

    4 .小結(jié)
    從以上計算結(jié)果可知,由于檢驗結(jié)果的散發(fā)性較大,如直接用貝賽爾公式計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差所得到的不確定度不適合每一個樣本。當(dāng)檢驗結(jié)果取對數(shù)后,用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差求檢驗結(jié)果的不確定度則使用方便,并且適合于每一個樣本。隨著檢驗結(jié)果的不斷增加,可隨時加入到合并樣本中,重新計算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差,更新其不確定度的取值范圍。

    編輯:songjiajie2010

     
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